EXTRACCIÓN DEL ADN
Esta práctica consiste en la extracción del ADN de una planta. Para ello es necesario varios procedimientos que ahora explicaré. La práctica la hicimos en pareja, yo la hice con Isabel Sáez. No es complicada, aun que se requiere precisión y atención.
En primer lugar, ponemos una hojita (muestra) en un tubo eppendorf.
El siguiente paso es incorporar SDS a nuestra mezcla y agitar.
Seguidamente incubamos a temperatura ambiente durante 5 minutos. Debemos incubar para que se rompan completamente los tejidos de la pared celular para poder acceder a la membrana plasmática.
Después de incubar, metemos los tubos a la centrifugadora. Este paso se realiza para separar muy bien la pared celular y que precipite.
Terminado el paso de centrifugar, extraemos el líquido que queda por encima del precipitado, con mucho cuidado de no extraerlo también. Ese líquido extraído, lo pasamos a otro tubo y le añadimos 300 ml de etanol del 70% y le damos unos golpecitos para que se mezcle. Volvemos a centrifugar.
Al terminar el centrifugado, tiramos el alcohol y nos queda en el fondo el ADN. Le echamos agua estéril y ya podemos ver el ADN, aun que en esta imagen no se aprecia muy bien.
En primer lugar, ponemos una hojita (muestra) en un tubo eppendorf.
A continuación, le añadimos 250ml de tampón a nuestra muestra, y con un palito machacamos muy bien hasta que no queden restos de hoja. Con esto rompemos los tejidos de la pared celular.
Seguidamente incubamos a temperatura ambiente durante 5 minutos. Debemos incubar para que se rompan completamente los tejidos de la pared celular para poder acceder a la membrana plasmática.
Después de incubar, metemos los tubos a la centrifugadora. Este paso se realiza para separar muy bien la pared celular y que precipite.
Terminado el paso de centrifugar, extraemos el líquido que queda por encima del precipitado, con mucho cuidado de no extraerlo también. Ese líquido extraído, lo pasamos a otro tubo y le añadimos 300 ml de etanol del 70% y le damos unos golpecitos para que se mezcle. Volvemos a centrifugar.
Al terminar el centrifugado, tiramos el alcohol y nos queda en el fondo el ADN. Le echamos agua estéril y ya podemos ver el ADN, aun que en esta imagen no se aprecia muy bien.
